要了解每对夫妇的详细病史资料就需要建立他们共同的病历。如果男性是正常或推测他没有主要的生殖障碍，那么临床医生就可以集中精力去检查他的配偶。如果怀疑男方有影响生育的因素就应进一步检查和处理。根据精液的细致分析和精子功能试验结果能了解大部分男性病人的病情，可以决定治疗的方案。精子数量很少但形态正常，可提示我们去考虑精子输出管道的问题。有足够的精子数量且形态正常但精子活动能力下降，可能病人有生殖道的感染或与精子有关代谢方面的问题。一般的实验室对精子形态异常的分析常较困难，但这是男性不育症重要的原因之一。这可能是精索静脉曲张引起的，或睾丸产生精子过程中某一环节有问题。因为很多因素可以交互作用导致不育，对待每位病人诊断时需要综合病史、体检、各种实验室检查结果一起来考虑。
一、精液分析
综合的精液分析(semen analysis)是对不育夫妇检查初步和重要的检查。常用的精液参数有精子密度、精子总数、活动率、正常精子形态百分比。次要的精液参数有精液量、白细胞浓度、颜色、粘稠度、pH等，这些也是很重要的。如果观察样本有异常．可以作进一步检查以发现不育的原因。甚至一份常规分析为正常的精液，细微的精子功能方面缺陷也可能存在。有些病人的精子未发现异常，但可能某些酶缺陷或结构异常如顶体问题，也有可能精子的表面被覆有抗体，这些抗体部分或完全阻碍了精子的受精。精液分析有关细节问是页见第六童．
二、免疫性不育的检查——抗精子抗体的检查
在过去的十年里，因为免疫珠试验的有效性使得在免疫性不育方面的研究取得很多进展。该方法是通过观察显微镜下可见的免疫珠情况，使我们了解大量的常见且难以对付的抗精子抗体(antispet-m antibodv)。最近选择新类型的免疫珠，
促进了该技术的发展，提供了更精确的测量工具，让我们了解抗精子抗体在血清、宫颈粘液、卵泡液、精浆、精子表面的情况以及抗体类型是IgG、IgA或IgM。甚至可以知道抗体是贴附在精子头还是尾部。
抗体成对的免疫珠是理想的精子一bound蛋白标签，可以直接在活精子表面看见。免疫珠的特性是一方面精确有效地与特异性抗原．抗体结合，另一方面很少发生非特异的结合。这显然优于早期的一些方法，如E LISA、细胞毒性分析等，这些方法常出现错误的阳性结果。
通常两种体液来源的抗精子抗体(男女一方或男女双方)存在，那么结果是足够肯定的，而且抗体可能严重地影响生殖过程。对女性而言，检测局部的抗体，宫颈粘液是一个重要部位，血循环抗体浓度测定也是必要的。做IvF的妇女血清循环抗体浓度测定很高者也应检查她们的卵泡液抗体浓度。男性的抗体检查常规应有局部的抗体和循环中的抗体。虽然局部的抗体对配子功能影响更重要，但在男女双方血清中的抗体表明问题的严重性，而且在治疗过程中可以作为一个重要的观察指标。
最近的进展也涉及到不育患者或自然流产的妇女血清中的有害物质和免疫因素的化验分析，特别受到关注的是用在IVF培养基中女方的血清。血清有害物质的检验主要是检验有关抗体和血清其他的有害物质，在体外实验中使用患者的血清、捐精、hamster·卵混合后进行精子穿透试验(SPA)时这些物质妨碍精子穿入和受精。这项试验可确定在血清中是否有精子粘附抗体等影响受精。并且在患者血清中卵子受精率与能成功受精的对照血清比较检验，以了解患者血清中有无抗受精因素或有害物质。我们已经发现，这种方法用在无透明带金黄地鼠卵一精子穿透试验(zone．free—hamster egg speml penetration test，ZSPT)中可比鼠胚胎培养更敏感和确切地鉴定血清或其他体液中是否存在影响受精的消极因素。
三、上游诊断试验
上游法(swim—up)精子洗涤和获能常用在免疫性不育、精液粘稠、精子穿透宫颈粘液障碍、少精症、女性宫颈因素不育、不明原因不育等不育夫妇IuI治疗过程中对精子的处理。通过洗涤方法去掉精子细胞碎片、白细胞、精浆中对精子有害的其他物质，使用培养基提高精子运动能力。此外，该方法可以用作一份或多份标本的精子精选和浓缩，使在女性生殖道受精机会增加。在体外受精(IVF)治疗过程中，上游法精子洗涤和获能也增加了精子的活力，纯化了精子。
在诊断上也可以用精子上游试验(diagnosticswim—up)，处理后精子活力的情况对IvF结果的预见有一定的价值。精液通过比较温和的离心几次，精浆去掉了，新的培养液加入，最有活力和高质量的精子游上来。这些精子用来授精，它们有更好的能力穿透透明带和受精。如果处理后的精子形态异常或运动欠佳，做普通的IvF将难以成功，应考虑选择ICSI。
四、精子膜功能测定——精子尾部低渗肿胀试验
精子尾部低渗肿胀试验(}wpo．osmotic swelling test，HOST)测定精子膜的功能完整性，从而判定精子潜在的受精能力。因为精子膜在精子的新陈代谢、精子获能、顶体反应、精子与卵融合方面具有重要意义。本试验系基于精子在低渗溶液中为保持其内外液体间的平衡，让水分通过精子膜而使其体积增大的原理，是一种简便的、有价值的评价精子功能的方法。
受试者禁欲3～7天，用手淫法采取一次全部精液置于37℃温箱中液化后，取一部分精液作常规分析，取另一部分精液作本试验。取0．1 rnl、离子浓度0．15mol／L、150mOsn／L低渗溶液(配制方法：果糖13．51g，枸橼酸钠7．35g加水至1000ral)于试管中，37℃孵箱5分钟，取出加0．1 ml精液，再入37℃孵箱30分钟，用加样器取20UI置载玻片上，加盖玻片，在400倍相差显微镜下观察精子尾部肿胀情况，至少计数100个精子，算出尾部肿胀率。尾部肿胀可表现为尾全部肿胀、粗短肿胀、弯曲肿胀、尾尖变曲或伴肿胀等类型。同时表明，精子尾部低渗肿胀率与常规精液分析结果中的精子活动率、精子存活率和正常形态精子百分率等呈显著相关性。
五、精子一宫颈粘液相互作用——性交后试验
性交后试验(post．coital tes，PCT)是观察性交后一定时间内精子在女性生殖道运行和存活情况，这种检查方法可以客观地观察精子的活动能力和穿透宫颈粘液能力，而且还可了解宫颈粘液、精浆与精子相互作用的变化，由此可能发现影响精子运动和穿透能力异常，精液或宫颈粘液可能存在的免疫因素及其病理改变。该法又称为体内穿透试验(in ViVo penetration test)。性交后试验是一种方法简单实用的精子一宫颈粘液相互作用实验，对寻找不育的原因有一定的参考价值。
(一)原理
不育夫妇在接近排卵期性交，性交后一定时间内检测宫颈管内外精子的数量、存活率及活动情况。
(二)操作程序
1．试验日期选在月经周期的中期，往往选择在第14天至第16天，或根据B超、BBT、宫颈粘液性状及阴道细胞涂片等监测女方排卵期，在排卵前1～2天嘱夫妇性交，性交后检查官颈粘液等标本。
2．在性交后6～8小时作检查，依次吸取官腔、宫颈内、外口及阴道后穹隆的液体，分别涂片，普通光学显微镜(200～400×)下观察精子的存活情况。
3．结果观察 阴道后穹隆粘液中的精子在2～4小时即失去活动能力(检查后穹隆粘液中的精子以证明性交过程中精液射精在阴道)。一般性交后2～3小时，宫颈内精子数最多，4小时后，精子数有所减少。因此性交后试验根据观察时间的不同可能得到不同的结果，一般选择在性交后6～10小时检查，有些情况下也可在性交后2-3小时检查，这是早期试验；或在性交后18～24小时检查，这是延迟试验。早期试验和延迟试验是对普通性交后试验的补充，早期试验和延迟试验了解的情况有区别，早期试验侧重于反映精子的穿透能力，延迟试验反映的是精子在宫颈粘液中存活情况(表20-1)。
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